Response of ovalbumin to fructose addition and pH variations-ultrasonic and FTIR study
Date
2021
Authors
Kavitha, Kathiroli
Palaniappan,Lakshmanan
Palaniappan,Lakshmanan
Authors
Date
2021
Datos de publicación:
10.7770/safer-V0N0-art2231
Keywords
Velocidad ultrasónica - Fructosa - Ovoalbúmina - FTIR - Viscosidad - pH - Interacciones no covalentes
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Abstract
Main aim of this work is to understand how the protein ovalbuminis affected by thepresence of cosolvent and variations in pH of the medium.The addition of cosolventin many cases is found to control the extent of denaturationand pH is one of the main sources of denaturant of proteins. In this work, keeping fructose solution as cosolventand pH ofthe solution as main variable, the extent of denaturation is analysed by ultrasonic methods and are further confirmed by FTIR amide-I second derivative spectraat 303 K. Obtained results showsthat denaturation is sensitive to pH, however, acidic and alkaline behave totally in a different way. It was found that the impact of alkaline pH produces lesser denaturation and isslower whereas the impact of acidic pH,though poor,isspecific and instantaneous.Ultrasonic analysis shows that pH variationcandenaturethe protein whereas the addition of cosolvent supports renaturation. FTIR spectra were recorded for the experimental samples from which the second derivative curve fitted spectra were constructed using Origin program. Quantitative assignment of peaks and the variations in cumulative areas calculated for the structures like α-helix, β-sheets etc confirms the observations of ultrasonic analysis that the pH variations aid in denaturation whereas the cosolvent supports the renaturation of protein.
El objetivo principal de este trabajo es comprender cómo la proteína ovoalbúmina se ve afectada por la presencia de codisolvente y variaciones en el pH del medio. Se encuentra que la adición de codisolvente en muchos casos controla el grado de desnaturalización y el pH es una de las principales fuentes de desnaturalización de proteínas. En este trabajo, manteniendo la solución de fructosa como codisolvente y el pH de la solución como variable principal, el grado de desnaturalización se analiza mediante métodos ultrasónicos y se confirma mediante el espectro de la segunda derivada de la amida I FTIR a 303 K. Los resultados obtenidos muestran que la desnaturalización es sensible al pH, sin embargo, lo ácido y lo alcalino se comportan totalmente de manera diferente. Se encontró que el impacto del pH alcalino produce una desnaturalización menor y es más lento mientras que el impacto del pH ácido es específicoe instantáneo. El análisis ultrasónico muestra que la variación del pH puede desnaturalizar la proteína mientras que la adición de codisolvente favorece la renaturalización. Los espectros FTIR se registraron para las muestras experimentales a partir de las cuales se construyeron los espectros ajustados a la curva de la segunda derivada usando el programa Origin. La asignación cuantitativa de picos y las variaciones en áreas acumulativas calculadas para las estructuras como hélice α, láminas β, etc. confirma las observaciones del análisis ultrasónico de que las variaciones de pH ayudan en la desnaturalización mientras que el codisolvente favorece la renaturalización de la proteína.
El objetivo principal de este trabajo es comprender cómo la proteína ovoalbúmina se ve afectada por la presencia de codisolvente y variaciones en el pH del medio. Se encuentra que la adición de codisolvente en muchos casos controla el grado de desnaturalización y el pH es una de las principales fuentes de desnaturalización de proteínas. En este trabajo, manteniendo la solución de fructosa como codisolvente y el pH de la solución como variable principal, el grado de desnaturalización se analiza mediante métodos ultrasónicos y se confirma mediante el espectro de la segunda derivada de la amida I FTIR a 303 K. Los resultados obtenidos muestran que la desnaturalización es sensible al pH, sin embargo, lo ácido y lo alcalino se comportan totalmente de manera diferente. Se encontró que el impacto del pH alcalino produce una desnaturalización menor y es más lento mientras que el impacto del pH ácido es específicoe instantáneo. El análisis ultrasónico muestra que la variación del pH puede desnaturalizar la proteína mientras que la adición de codisolvente favorece la renaturalización. Los espectros FTIR se registraron para las muestras experimentales a partir de las cuales se construyeron los espectros ajustados a la curva de la segunda derivada usando el programa Origin. La asignación cuantitativa de picos y las variaciones en áreas acumulativas calculadas para las estructuras como hélice α, láminas β, etc. confirma las observaciones del análisis ultrasónico de que las variaciones de pH ayudan en la desnaturalización mientras que el codisolvente favorece la renaturalización de la proteína.
Description
Keywords
Velocidad ultrasónica , Fructosa , Ovoalbúmina , FTIR , Viscosidad , pH , Interacciones no covalentes
Citation
10.7770/safer-V0N0-art2231